Храм бесстолпный, построен в 1660 году. До 1764 года относился к Ярославскому Спасскому монастырю.
Это второй храм в правобережной части города. Уцелел он лишь частично, однако с 2001 года в нем совершаются службы. Главной святыней храма была Донская икона Пресвятой Богородицы, почитаемая как чудотворная (сейчас хранится в Воскресенском соборе). По преданию, 1771 году она спасла жителей Борисоглебской слободы от морового поветрия. Память о почитании чудотворного образа сохранилась в названии одной из улиц Борисоглебска – Донской.